春季海参养殖常见问题及措施/乳酸菌应用于海参养殖的可行性

水产养殖网 2018-02-12 11:07:36

春季刺参池塘养殖常见问题及管理措施


  ■山东省烟台市水产研究所 刘锡胤 刘蓬 陈伟 黄华
   东方海洋科技股份有限公司 周文江/文图

  春季是刺参生长速度最快的时期,也是池塘养殖刺参病害的多发季节,稍有不慎就会暴发病害甚至引起刺参大量死亡。

  一、常见问题

  1.漂参
  常会见到有的刺参漂在水面。漂浮初期大多未死亡,也无明显的化皮与肿嘴现象,手摸参体略感发软,解剖可见有的已排脏,漂浮一段时间后有的刺参会下沉死亡。
  春季漂参主要原因:①因冰层溶化造成的池水盐度分层。冬季结冰的池塘,开春冰层溶化后若未及时将表层低盐度水排掉,会形成盐跃层,池水比重上低下高,上层富氧水不易通过上下对流传输到底层,导致底层溶氧不足,水质恶化,刺参便会沿池边向溶氧较高、水质较好上层移动。为满足自身对氧气的需要,刺参移动过程中会本能地加大对水的吸收,整个呼吸树、肠胃与体腔膨胀,加之越往上层吸入的水盐度越低,参体比重变小,运动能力下降,出现“发飘”现象,最后浮在水面。②因温度变化所致的池水上下层同温以及池水分层。开春后温度逐渐回升,但气温回升速度高于水温,导致池水温度由冬季的下层高上层低逐渐过度到上下层相同,即为常说的同温期。该阶段池水上下层比重相同,难以形成垂直对流。随着气温进一步回升,到了5月~6月份 后,水温又出现上高下低,上层水比重低于下层水,更难以形成上下对流。这两种情况均使池水不能通过上下对流进行交换,使上层较高的溶解氧难以传到下层,池底氨氮、硫化氢、亚硝酸盐等有害物质不能被氧化分解或逸出水面,加之刺参在底层活动本身还要消耗大量氧气,引起池底缺氧,导致刺参赖以生存的底层水质恶化,刺参便会沿池底向水质相对好的上层移动,最后漂到水面。

  2.刺参下礁晚
  开春后常会有部分刺参迟迟不下礁的现象。这样的刺参大多机体发硬,体色暗淡,活动迟缓。主要原因:①底质不良。冬季刺参很少摄食,池底沉积了大量死亡的底栖硅藻和其它水生动植物尸体以及其它有机碎屑,随着水温回升,这些有机物会腐烂变质,产生氨氮、硫化氢、亚硝酸盐等有害物质,底质环境恶化,刺参只得仍呆在环境相对好的参礁上,不愿下礁。②池底缺乏优质天然饵料。刚开春时,池底硅藻等优质天然饵料少,刺参仍长时间停留在底栖硅相对丰富的参礁上采食。

  3.患腐皮综合症
  这是春季刺参池塘养殖中最常见、危害最严重的疾病,又称为“化皮病”、“溃烂病”、“肿嘴病”、“摇头病”。发病初期频繁摇头,触手不能灵活收缩,口部肿胀,附着力减弱,对外界反应迟钝,摄食减少;继而疣足尖端和身体局部溃烂,有的会伴随现排脏现象;后来身体收缩、僵直,肉刺变秃甚至烂掉;接着口腹部先出现溃疡,形成小的蓝白色斑点;最后病灶扩大,溃疡处增多,表皮大面积腐烂,严重的导致刺参大量死亡。此病主要原因:①摄食劣质饵料。刺参刚出爬摄食时,因池内缺乏优质饵料,只得吞食冬季沉积到池底的腐殖质,引起肠道疾病,继而引发从肿嘴开始的摇头、化皮等病症,还常伴随吐肠现象,这就是生产上常见的刺参开口越早,发病越早、越严重的原因。②水环境差。因上述原因所致的池底缺氧,氨氮、硫化氢、亚硝酸盐等有害物质含量增加,长时间生活在这样的环境下,轻则造成刺参发病,重则直接导致刺参窒息死亡。③盐度降幅过大。开春后冰层大量溶化,来不及排淡,池塘局部盐度骤降,也易引起刺参化皮。④刺参免疫力差。经过漫长的冬季后,刚起蜇的刺参免疫力和抗应激能力弱,极易被细菌感染,引起溃烂。此病以1~4月份最常见,感染率高、传染速度快,死亡率高。

  二、主要管理措施

  1.清池与消毒
  ①清池。养殖3年以上的池要彻底清整。将刺参捡出,排干池水,清除淤泥与杂物,并将参礁用高压水枪冲净,曝晒数日,必要时回添新泥沙。然后加水淹没参礁,每亩泼洒100kg左右的生石灰。用生石灰消毒1周后,排干池水,重新纳满水,浸泡3天~5天后放掉再纳水。
  ②消毒与底质改良。底质的好坏,直接决定了养参的成败,有“养参先养底”之说。经过漫长的冬季后,池底会沉积一层厚厚的腐殖质,并产生大量有害细菌。故无须排干水彻底清池的池塘开春后也要进行消毒与底质改良。一般在刺参下礁前先投1次~2次方便、高效的底质改良剂,初步改善池底环境。然后每亩泼生石灰15kg~20kg。生石灰可杀灭病原微生物,调节池水酸碱度,改良底质。应注意的是,要将生石灰碾碎用水化开后全池均匀泼洒,切勿在池底局部形成堆积,以免伤害刺参。

  2.换水
  换水有利于打破水体分层,排掉部分病菌和代谢废物,改善池塘环境。换水时应注意以下几点:①冬季结冰的池,待冰层溶化后,要先通过排淡闸门排除表层低盐度水再逐渐补充新水。②每次换水量不易太大。因冬季换水很少,开春后突然大量换水会使池塘水环境在短时间内变化幅度过大,刺参会因强烈的应激反应而诱发疾病,加之此时自然海区的水温仍较低,一次换水过多也不利于池塘水温的回升。刚开春时日换水10%左右即可,随着水温的升高逐渐升至20%左右。③最好选择在海水温度较高的晴天中午或下午换水。④是要设拦污设施,注水口设置40目~60目过滤网,进水渠道和海边抽水处也应设拦污设施,防止自然海区的敌害生物、油污以及其它杂物进入池塘。⑤换水前要注意观察海区和池塘的水质情况,若海区水质不良要暂停换水,大雨过后也不要急于纳水,等到海区水环境恢复正常后再进水。如池塘水质恶化或刺参发病要立即换水。
春季应保持较低的水位,以充分利用光照、加快水温回升,促进底栖硅藻及其它浮游植物的繁殖,以通过浮游植物的光合作用增加水中溶氧。低水位还有利于风浪打破水体分层和水的表面张力,使池水上下层形成对流,防止池底缺氧。但刚开春时池水也不能过浅,因初春季节天气变化较大,一旦遇到寒流袭击,水太浅易造成池水温度发生剧烈波动,引发刺参疾病。综合这两方面因素,一般保持0.8m~1.2m的水位。

  3.肥水
  初春时池水清瘦、生物饵料少,适量施肥,尽快培肥水质,可增加池内天然饵料量,吸收有毒的无机盐,增加水中溶氧,并降低池水透明度,抑制水草及大型藻类过度繁殖。春季尽管水温较低,但由于该季节池内滤食性生物相对较少,肥水效果不亚于高温期,并且低温时繁殖的大都是适合刺参营养需求的硅藻类。为保证养殖刺参的质量,投放参苗后的池塘不提倡使用化肥,而直接施有机肥的肥水速度太慢并且易污染水质。可用近年来上市的高效、无污染的肥水制剂,也可将发酵后的有机肥(如鸡粪)分装于若干网袋内,挂在加水口处,随水流将肥料均匀施遍全池。有机肥用量不宜太多,每亩总用量不超过100千克。在施肥的同时还可以向水中施微生态制剂(如光合细菌、芽孢杆菌、枯草杆菌、硝化细菌等),以尽快培养起底栖硅藻和以硅藻为主的浮游植物,并促进有益菌繁殖,使池水保持合理的藻相和菌相。

  4.水质调节
  在上述消毒、改底、换水、肥水的基础上,日常主要靠施微生态制剂等方法调节水质。每月施1次~2次微生态制剂,可分解腐败的有机质,降低有害物质含量,抑制有害菌繁殖,增加池水溶氧。微生态制剂具有天然、无毒、无污染、无副作用等优点,有些还可被刺参直接食用,有助于提高刺参的免疫力,促进生长发育,减少疾病发生。微生态制剂使用过程中结合增氧剂、底质改良剂效果会更好。另外,还可移植大型藻类。池内保持适量的水草及大型藻类,可吸收水中有害的无机盐,并能通过光合作用增加溶解氧,还会为刺参提供适宜的栖息场所,使其免受强光直射,夏季还有利于降低水温。但不能太多,否则易使池水过于清瘦,而且老化枯死后易败坏水质。最好将其移植到池内定点位置,以便于枯死后及时捞取。若拉上浮梗吊养,效果会更好。

  5.参苗投放
  春季是投放参苗的最佳时间,此时敌害生物少,水温逐渐升高,投放的参苗能很快适应新环境,成活率高。放苗时间不宜过晚,在4月份前水温升至7℃~8℃时就应投放,以充分利用春季适温生长期。刚清完池、敌害少的池可投放500头/千克~1000头/千克的小苗,敌害较多的老池要放100头/千克~400头/千克的大苗。

  6.投饵
  春季刺参肠道处于一年中最长、功能最完善的阶段,也是全年摄食最旺盛、饵料利用率最高的时期,有“春生肥”之说。该阶段因池内缺乏天然饵料,适当投喂人工饵料能迅速补充越冬期间的营养消耗,增强体质、提高抗病能力,否则刺参会大量摄取池底的腐败有机物,引发 疾病。一般在刺参临近出爬前先投1次~2次优质海泥、以略微盖满池底为好,以免刺参接触有害物质。出爬后,依池内天然饵料的具体情况每周投1次~2次人工饵料,主要包括鼠尾藻粉、海带粉、配合饵料等。为提高刺能的抗病能力,投饵时可适当添加免疫多糖、维生素、氨基酸等营养物质。



乳酸菌在水产养殖中的应用及其应用于海参养殖的可行性


作者:大连海洋大学农业部海洋水产增养殖学重点开放实验室 张艳婷 任同军
   辽宁省农业科学院大连生物技术研究所 孙永欣

[摘要] 本文综述了近年来乳酸菌对不同水产动物生长促进和免疫力诱导的作用机制的研究,并探讨了乳酸菌应用于海参养殖的可行性。

[关键词] 乳酸菌;水产动物;刺参;可行性

乳酸菌(lactic acid bacteria)是一群形态、代谢性能和生理学特征不完全相同的革兰氏阳性菌的统称。目前乳酸菌在细胞分类学上至少有23 个属,随着细菌分类研究的不断深入,乳酸菌的范围也不断扩大。目前其中应用最广的为乳酸杆菌和双歧杆菌。

1 乳酸菌在水产养殖中的应用

1.1 净化水质,改善生态环境

乳酸菌与芽孢杆菌、光合细菌、反硝化菌等有益菌混合使用,可以促进养殖水体饵料生物大量繁殖、生长,并且可分解残饵、粪便及水中有机质,改良水体环境,抑制水体中有害菌的繁殖生长,调节菌藻平衡。

1.2 提高免疫力

乳酸菌对水生动物免疫功能的影响研究较多。在饲料或水体中添加乳酸菌活菌或灭活菌都可以提高水生动物的细胞免疫和体液免疫功能。乳酸菌对水生动物免疫反应影响见表1。

1.2.1 细胞吞噬活性

细胞吞噬作用在机体的抗菌防御中起着非常重要的作用, 能够在抗体产生之前激活早期炎症反应。饲料中添加乳酸菌组,(包括沙克乳酸杆菌,乳酸球菌, 明串珠球菌可以激活宿主吞噬细胞并提高细胞吞噬活性,研究同时表明,乳酸菌无论是活菌还是灭活菌都能在水产养殖生产中提高鱼类的细胞吞噬活力。

Pirarat 等研究表明,投喂鼠李糖乳酸杆菌(1010CFU/g)可以显著提高罗非鱼的细胞吞噬活性。但是乳酸菌不能提高大菱鲆头肾吞噬细胞的吞噬活性。

1.2.2 呼吸爆发活力

呼吸爆发活力是鱼类先天免疫防御中的一个重要指标。乳酸菌与枯草芽孢杆菌均可以使鱼类的呼吸爆发活力提高。并且高温灭菌的德式乳酸杆菌、枯草芽孢杆菌、乳酸球菌在体外环境下仍然可以提高金头鲷头肾白细胞的呼吸爆发活力。

注:(1)+为升高,-为下降;(2)枯草芽孢杆菌,嗜酸性乳酸杆菌,沙克乳酸杆菌,乳酸球菌,明串珠菌, 格式乳酸球菌, 鼠李糖乳酸杆菌, 肠球菌, 德式乳酸杆菌, 植物乳酸杆菌,丁酸梭菌酿酒酵母。

1.2.3 溶菌酶活性

溶菌酶是鱼类先天免疫系统中的一种重要的杀菌酶, 是鱼类对抗传染性病原体的不可缺少的工具。鼠李糖乳酸杆菌、乳酸球菌、明串珠球菌可使褐鳟血清溶菌酶水平升高。

此外,Taoka 等研究表明,乳酸菌还可以提高罗非鱼鱼皮肤黏膜溶菌酶的水平,并且加入水中比口服效果更显著。但也有报道称在虹鳟饲料中添加乳酸菌并不能提高溶菌酶水平。

1.2.4 过氧化物酶

过氧化物酶是一类能利用氧化自由基生成次氯酸从而杀死病原菌的重要酶类。Salinas 等研究发现,用含德式乳酸杆菌的饵料投喂金头鲷3 周,能使血清过氧化物酶活性升高, 但头肾白细胞吞噬活性未见升高。Salinas 等研究表明,饲料中添加乳酸菌并不能影响金头鲷血清蛋白酶活性。

1.2.5 补体活性

在硬骨鱼类中, 补体系统在免疫系统中起着关键作用,具有趋化、调理、吞噬和调节等作用。补体参与机体非特异性免疫的主要作用机制是通过裂解直接杀死病原菌。研究表明,乳酸菌直接投喂或加入水中均可以提高鱼类自然补体的活性。

1.2.6 细胞因子

细胞因子是由免疫细胞产生的蛋白质调节因子,有利于细胞的生长分化,加强机体防御机制。乳酸菌可以调节细胞因子在宿主中的表达。Panigrahi 等研究发现,鼠李糖乳酸杆菌、肠球菌和枯草芽孢杆菌可以诱导虹鳟脾脏和头肾的促炎症细胞因子,如白细胞介素-1(IL-1)、转化生长因子β(TGF-β)的产生。Picchietti 等研究表明,在舌齿鲈(体内环氧化酶-2(COX-2)的合成随着IL-1 和TGF-β 含量的减少而降低。COX-2 可以促进肠道创伤愈合,但长期慢性的表达可导致炎症性疾病的发生。因此,COX-2 表达的平衡对于维持体内的生态平衡非常重要的,而且COX-2 基因表达的调节是一些益生菌抗炎症反应的关键作用机制。

1.3 促进生长

乳酸菌能分泌乳酸,产生多种消化酶,有助于鱼类消化吸收,促进生长。Byun 等从鲆鱼分离筛选出一菌株DS-12,其表现出强的抗菌活性,能抑制多种鱼体病原菌(如鳗弧菌、嗜水气单胞菌等)的生长,饲喂试验显示,饲喂含有DS-12 菌株的试验组,鱼的平均增重比对照组快,表明乳酸菌既有抑菌又能促生长的双重机能。Suzer 等报道,在黑鲷的仔鱼发育阶段使用乳酸菌,可以提高仔鱼的生长性能和消化酶活性, 添加到仔鱼的活饵料以及添加到活饵料和水体中, 效果达显著水平。Ha 和Shunsuke研究表明,饲料中添加热灭活的植物乳酸杆菌(1g/kg)可提高对虾的存活率(87.50 %)、体增重率(785 %)、特定生长率(7.28 %)。王国霞等试验表明,10 %的乳酸菌添加组对虾的成活率、增重率、特定生长率分别较空白组提高2.53 %、7.13 %、4.23 %,饵料系数较空白组降低8.38 %,表明添加乳酸菌可以一定程度地提高对虾幼虾的生长性能和消化酶活性。

1.4 对致病菌的抑制作用

乳酸菌能有效调整水产动物肠道的菌群平衡,通过营养竞争、附着位点竞争或分泌抗生素细菌素等毒素杀死或抑制病原微生物,增强抗感染能力,调节机体肠黏膜的免疫活性, 提高动物遭受病害侵袭时的存活率。Gatesoupe研究表明,乳酸菌可以提高大菱鲆抵抗致病性弧菌的能力。陈营等体外试验发现,从健康牙鲆肠道中分离得到的多种乳酸菌,对弧菌均有抑制作用。杨莺莺等研究表明,乳酸杆菌及其代谢物质(如乳酸菌肽、细菌素、乳酸、过氧化氢、乙酸)对弧菌具有协同抑制作用。周海平等为探明乳酸杆菌LH 对水产养殖病害的生物防治功能,采用试管稀释法和平板抑菌圈检测法,探讨了乳酸杆菌代谢产物对沙蚕弧菌、哈维氏弧菌、溶藻弧菌、副溶血弧菌、漂浮弧菌的抑制能力,结果表明,乳酸杆菌LH 对病原弧菌具有良好的抑制作用。杨勇研究证明,乳酸菌代谢产物对鳗弧菌的生长具有非常显著的抑制作用, 该代谢产物对鳗弧菌的抑制效率在90 %以上。窦晓明等研究表明,3 株乳酸菌(命名为A-1,A-2,A-3)胞外产物对副溶血弧菌有较强的抑制作用。

2 乳酸菌的作用机理

目前可将乳酸菌促进动物生长和免疫作用机制分为两种:一是直接作用,即菌体本身及其活性代谢物对有害物质的黏附或者降解; 二是间接作用, 即乳酸菌通过调节肠道菌群及其代谢酶活性,调节机体免疫活性及机体部分酶活性等方式起到间接益生作用。

2.1 提供营养物质,直接促进生长

乳酸菌能产生B 族维生素,包括叶酸、生物素、维生素B6和维生素K 等, 能够直接为宿主提供必需的营养物质,促进动物生长。此外,乳酸菌的酸性代谢产物能加强肠道蠕动, 有利于养分的消化吸收。

2.2 产生抗菌物质

在乳酸菌的生长代谢过程中能产生有机酸、过氧化氢等抗菌物质来达到抑制致病菌和外源病原菌生长的目的。

2.3 调节肠道微生态平衡

乳酸菌能防止病原菌在肠上皮细胞表面附着、定植并入侵肠道细胞,这种机制被称为“黏附抗性”。乳酸菌在肠道内,可通过竞争致病菌的吸附位点抑制有害病原微生物生长,来调节水生动物肠道微生态平衡和免疫反应。

2.4 对免疫系统的影响

Ouwehand 等给出了摄入益生素对免疫系统刺激作用的可能途径:抗原性物质通过淋巴结集中的连滤泡上皮,进入淋巴组织。通过途径有两种:一是微生物代谢产物或碎片作为小分子抗原直接通过普通上皮细胞或者透过上皮细胞间的紧密连接缝隙;二是微生物细胞本身由微褶细胞(M-Cell)通过胞饮作用传送给位于M-Cell 包囊中的巨嗜细胞等。抗原进入淋巴组织后,或由抗原提呈细胞处理后或直接交给淋巴细胞,产生相应的免疫应答。

3 乳酸菌应用于刺参养殖研究初探

目前,乳酸菌作为益生菌在鱼虾等水产养殖中得到成功应用,但由于刺参摄食方式特殊性,还鲜见其应用于刺参养殖中的报道。刺参已成为我国北方最大的海水养殖种类。然而,频繁发生的刺参病害问题给刺参养殖业造成了巨大的经济损失。由于乳酸菌具有耐酸抗盐性,刺参育苗以及养殖的温度范围分别在2l ~ 27 ℃和5 ~ 28 ℃,养殖水体的pH 为7.5 ~ 8.6,盐度为27 ‰ ~ 35 ‰,而乳酸菌在pH 6.5 ~ 8.5,40 ℃以下可以生长。可见,海参育苗养殖的上述基本条件完全满足乳酸菌正常生长和繁殖的需要。另外,乳酸菌是厌氧菌,在缺氧条件下也能生长和发挥作用,只要在海参体内得以成功生长和繁殖,其将可抑制致病菌的生长。研究证实,海参“腐皮综合症”等皮肤病是由弧菌引起的,乳酸菌可以抑制病原性弧菌的生长。张涛等研究表明,添加从健康仿刺参肠道内筛选获得的乳酸菌L-2、芽孢杆菌K-3 和芽孢杆菌J-9 可以提高仿刺参消化酶的活性,尤其是蛋白酶和淀粉酶的活性,并且对提高刺参免疫功能有积极作用。袁成玉等研究表明,益生菌制剂可以提高幼刺参的消化酶活性和成活率,并能促进生长,影响肠道蛋白酶和淀粉酶活性。王亚敏认为,芽孢杆菌能够提高刺参的生长率及存活率,并能一定程度提高体腔液中磷酸酶的活力。虽然乳酸菌可以提高刺参消化酶活性和免疫力,但由于刺参养殖以池塘或围堰养殖为主,乳酸菌可能在水体中溶失,而且养殖不规范,无固定营养配方以及乳酸菌自身特点,尚不能实现规模化使用。因此,将刺参养殖科学化,规范化,并筛选出在刺参生长温度下能够发挥作用的菌株,才能使乳酸菌在海参、鲍鱼等舔舐性和刮食性水产动物养殖中得到更广泛应用。